Homozygotyczna mutacja missense w ludzkim KLOTHO powoduje ciężką kalcynozę nowotworową

Te różne kliniczne fenotypy najprawdopodobniej wynikają z różnych funkcji zmutowanych genów. Pomimo podobieństw biochemicznych, takich jak wysoki poziom krążących Fgf23 i hiperfosfatemia (12), istnieje kilka różnic biochemicznych pomiędzy myszami z niedoborem Kl a naszym pacjentem. Po pierwsze, chociaż myszy z niedoborem Kl mają zwiększone wydalanie wapnia z moczem (29), nasz pacjent nie miał hiperkalciurii. Po drugie, myszy z niedoborem Kl mają nieprawidłową regulację sygnalizacji insuliny / IGF-1, co powoduje hipoglikemię i zwiększoną wrażliwość na insulinę. W przeciwieństwie do tego, nasz pacjent miał normalne stężenia glukozy na czczo i insuliny. Po trzecie, poziomy PTH są niskie u myszy z niedoborem Kl, w porównaniu z myszami typu dzikiego (15) i podobnie są w przeważającej mierze niskie lub normalne w przypadkach kalcynozy nowotworowej, które wynikają z mutacji FGF23 lub GALNT3. Jednak nasz pacjent miał nadczynność przytarczyc podczas prezentacji, a następnie przeszedł subtotalną paratyroidektomię gruczołów hiperplastycznych. Przyczyna nadczynności przytarczyc była niejasna, ponieważ podwyższony poziom fosforanu w surowicy jest bodźcem dla PTH, ale wysoki poziom wapnia i 1,25 (OH) 2D hamują wytwarzanie PTH. Ponieważ KL ulega ekspresji w przytarczycach (30), KL może odgrywać bezpośrednią rolę w regulacji PTH u ludzi. Alternatywnie może to być wynikiem trzeciorzędowej nadczynności przytarczyc spowodowanej uporczywą hiperfosfatemią. Brak nadczynności przytarczyc u innych pacjentów z łuszczycą bruzdową oznacza, że może to być cecha ograniczona do tego konkretnego pacjenta. Konieczne będą dalsze badania dodatkowych przypadków u ludzi w celu wyjaśnienia, czy nadczynność przytarczyc jest wyjątkową odpowiedzią naszego pacjenta lub cechą nierozerwalnie związaną z zaburzeniem u ludzi. Podsumowując, wykazaliśmy, że homozygotyczna utrata funkcjonalnej mutacji KL u człowieka spowodowała ciężką kalcynozę nowotworową, a nie wczesne starzenie się, jak wcześniej proponowano. Pomimo podwyższonych stężeń FGF23 w krążeniu, mutacja H193R zmniejszyła zdolność KL do funkcjonowania jako kofaktor niezbędny do przekazywania sygnału przez FGF23, prowadząc do hiperfosfatemii, zwiększonego stężenia 1,25 (OH) 2D i późniejszych zwapnień ektopowych. Fakt, że mutacja w KL została znaleziona u pacjenta z kalcynosem nowotworowym pokazuje, że oprócz FGF23 i GALNT3, KL powinno być teraz brane pod uwagę w diagnostyce molekularnej wapnienia pęcherza. Metody Pacjenci i osoby kontrolne. Badanie zostało zatwierdzone przez Institutional Review Board of Indiana University. Uniwersytet Purdue w Indianapolis. Pisemną świadomą zgodę uzyskano od uczestników przed udziałem w badaniu. Próbki krwi pobrano od pacjenta z wapniakiem nowotworowym i zdrowymi osobnikami dopasowanymi do rasy. Pomiar biochemii surowicy. Rutynowe biochemie kliniczne analizowano standardowymi metodami. Stężenia FGF23 oznaczono przy użyciu 2 różnych testów: Zestaw FISA FGF23 (Kainos Laboratories Inc.), który rozpoznaje tylko nienaruszony FGF23 z przeciwciałami monoklonalnymi oraz Zestaw ELISA dla ludzkiego FGF-23 (C-Term) (Immutopics International), który wykrywa zarówno nienaruszone jak i C-końcowe fragmenty FGF23. Mutacyjne analizy. Genomowy DNA ekstrahowano z próbek krwi za pomocą QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen). Wszystkie egzony i ich sąsiadujące sekwencje intronowe dla genów FGF23, GALNT3 i KL amplifikowano za pomocą polimerazy DNA Taq (New England Biolabs) lub zestawu Multiplex PCR Kit (Qiagen). Każdy amplikon PCR był sekwencyjnie sekwencjonowany z primerów do reakcji do przodu i / lub do tyłu przy użyciu zestawu do sekwencjonowania Big-Dye Terminator Cycle i analizatora genetycznego ABI PRISM 3100 (Applied Biosystems). Mutacyjna analiza dla genu receptora wapniowego (CASR) została przeprowadzona przez GeneDx. Analiza PCR-RFLP przejścia A-do-G w KL została przeprowadzona przez amplifikację genomowego DNA niosącego przejście, a następnie trawienie restrykcyjne za pomocą BsrI (New England Biolabs)
[podobne: layman elbląg, gafako, electrovit ]